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ELISA试验中血清标本的收集、保存及保留所需要注意的:

发布时间:2018-07-03 23:14:08 来源:欧贝特检测设备 浏览:

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ELISA试验中血清标本的收集、保存及保留所需要注意的: 大部份ELISA试剂盒检测均以血清为标本。血清标本可按惯例办法搜集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物资,以HRP为符号的ELISA 测定中,溶血标本可能会添加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反响。1般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时刻太长致使血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超出1周测定的需⑵0℃保存。冻住血清融解后,蛋白质部份浓缩,散布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保

大部份ELISA试剂盒检测均以血清为标本。血清标本可按惯例办法搜集,应留意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物资,以HRP为符号的ELISA 测定中,溶血标本可能会添加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反响。
1般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时刻太长致使血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。超出1周测定的需⑵0℃保存。冻住血清融解后,蛋白质部份浓缩,散布不均,应充分混匀并避免产生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。重复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作屡次检测,宜少数分装冰存。保存血清自搜集时就应留意无菌操作,也可参加恰当防腐剂。


抗凝不完全的标本因纤维蛋白原的烦扰而构成假阳性,主张尽可能不用抗凝血特别是肝素抗凝剂。
elisa试剂盒详细留意事项:
1) 要留意避免显现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育进程中吸附于固相,从而与后边参加的HRP底物反响显色。
2) 样本的搜集及血清别离中要留意尽可能避免细菌污染,1则细菌的成长,其所排泄的1些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分化效果;2则1些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定办法产生非特异性烦扰。
3) 血清标本如是以无菌操作别离,则可以在2~8℃下保存1周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长时刻保存,应在⑺0℃以下。
4) 冰冻保存的血清标本须留意避免因停电等构成的重复冻融。标本的重复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等份子产生破坏效果,从而引发假阴性结果。另外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振动,重复颠倒混匀便可。
5) 标本在保存中如显现细菌污染所酿成的的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检测。







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